五种出血热病毒重组酶聚合酶等温扩增方法的建立
五种出血热病毒重组酶聚合酶等温扩增方法的建立
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Beijing: People's Military Medical Press
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Chinese
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Beijing: People's Military Medical Press
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目的建立五种出血热相关病毒,即扎伊尔型埃博拉病毒、苏丹型埃博拉病毒、马尔堡病毒、拉沙病毒和黄热病毒的一步法重组酶聚合酶等温扩增(RPA)技术,为病原体的确定提供现场快速检测方法。方法通过基因组序列分析,选择每种病毒的特异核酸片段作为检测靶基因,针对靶基因序列设计RPA检测的引物和探针;取系列稀释的模板基因进行RPA检测,确定其灵敏性;取出血热相关病毒核酸为模板进行RPA检测,确定其特异性;验证不同温度反应条件(37~42℃)对检测结果的影响。结果五种出血热病毒的RPA反应体系均可有效扩增靶基因,灵敏性为1.5×10^2~1.5×10^3copies/反应,与其他出血热相关病毒的核酸无交叉反应;RPA实验在37~42℃均可实现靶基因的有效扩增。结论建立了五种出血热病毒的RPA等温扩增体系,该体...
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五种出血热病毒重组酶聚合酶等温扩增方法的建立
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Record Identifier
TN_cdi_wanfang_journals_jfjyxzz201706010
Permalink
https://devfeature-collection.sl.nsw.gov.au/record/TN_cdi_wanfang_journals_jfjyxzz201706010
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ISSN
0577-7402
DOI
10.11855/j.issn.0577-7402.2017.06.09