泡桐丛枝植原体pPaWBNy-2-ORF4编码蛋白的抗体制备和表达分析
泡桐丛枝植原体pPaWBNy-2-ORF4编码蛋白的抗体制备和表达分析
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中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所,国家林业局森林保护学重点实验室,北京100091
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Chinese
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中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所,国家林业局森林保护学重点实验室,北京100091
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以感病泡桐组培苗提取的DNA为模板,采用PCR方法扩增pPaWBNy-2-ORF4的部分片段。将目的片段克隆到原核表达载体pGEX-4T-3,重组质粒pGEX-p2ORF4转化大肠杆菌Rosseta（DE3）菌株。IPTG诱导表达,分子量约为38 kDa的含GST标签的融合蛋白得到表达。切胶回收目的蛋白,免疫大白兔制备抗血清。间接ELISA测定抗血清的效价约为1∶4 096,免疫印迹实验显示：抗血清能够与原核表达的GST融合蛋白发生特异的免疫反应,与pPaWBNy-1-ORF5的原核表达蛋白无明显的交叉反应。利用制备的抗血清,在感病泡桐饲毒的茶翅蝽中检测到分子量约为18 kDa的蛋白条带,而在无菌茶翅蝽和感病泡桐组培苗中均未检测到,表明pPaWBNy-2-ORF4在饲毒的茶翅蝽中表达,而在感...
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泡桐丛枝植原体pPaWBNy-2-ORF4编码蛋白的抗体制备和表达分析
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Record Identifier
TN_cdi_wanfang_journals_lykxyj201304016
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https://devfeature-collection.sl.nsw.gov.au/record/TN_cdi_wanfang_journals_lykxyj201304016
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ISSN
1001-1498
