β-分泌酶底物肽反转录病毒载体及其包装细胞株的构建
β-分泌酶底物肽反转录病毒载体及其包装细胞株的构建
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西安医学院组织学与胚胎学教研室,陕西,西安,710021%西安交通大学医学院人体解剖与组织胚胎学系,陕西,西安,710061
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Language
Chinese
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西安医学院组织学与胚胎学教研室,陕西,西安,710021%西安交通大学医学院人体解剖与组织胚胎学系,陕西,西安,710061
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Contents
目的 用pLXSN反转录病毒载体构建介导β-分泌酶底物肽（BACEsp）基因表达的pLXSN—BACEsp反转录病毒载体，并建立高效、稳定表达BACEsp的包装细胞株。方法 根据BACEsp基因序列设计引物，PCR合成的BACEsp片段和pLXSN载体用EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切后连接，构建成表达BACEsp的pLXSN—BACEsp反转录病毒载体。用脂质体介导转染PT67包装细胞，经抗性筛选后，挑单克隆扩大培养，用NIH3T3细胞测定病毒滴度，筛选出高效产毒细胞株。结果 经酶切、连接后构建成的质粒称为pLXSN—BACEsp，经测序证实构建成功，无任何碱基突变。经脂质体介导转染包装细胞、抗性筛选和测定病毒滴度，筛选出具有高病毒滴度的细胞集落，扩大培养后建立BAC—Esp高效表达的包装细胞...
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β-分泌酶底物肽反转录病毒载体及其包装细胞株的构建
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Record Identifier
TN_cdi_wanfang_journals_xaykdxxb200706006
Permalink
https://devfeature-collection.sl.nsw.gov.au/record/TN_cdi_wanfang_journals_xaykdxxb200706006
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ISSN
1671-8259
DOI
10.3969/j.issn.1671-8259.2007.06.006
